Cardiopatía Isquémica : Reacción en cadena de la Polimerasa (PCR) para determinar las Cardiopatías Isquémicas

La PCR es una técnica molecular que permite amplificar regiones especificas del DNA para facilitar su estudio y detección.

Tema: Lipoproteina A: Asociación entre su extrema elevación y sus polimorfismos genéticos con lesión cardíaca y vascular evaluadas por medio de TAC.

Objetivos: 1) Analizar a un grupo de pacientes con valores sanguineos elevados de lipoproteina A (mayor a 100mg/dl), la relación con calcificaciones cardiovasculares torácicas en valvulas cardiacas y arteriales, en arterias coronarias y en la aorta torácica. Se detecta mediante TAC.
2) Evaluar tres polimorfismos genéticos vinculados con los niveles de lipoproteina A elevada y las lesiones a nivel cardiovascular por calcificación.
Muestra: El tipo de muestra seleccionado para este estudio es la sangre obtenida por punción venosa (de 40 pacientes).

Tipo de ácido nucleico: Ácido Desoxirribonucleico (DNA)

Gen a Amplificar: El gen explorado es considerado como un determinante de los niveles de la lipoproteina A y de 5 de sus isoformas se denomina kringle IV con dominio tipo 2 (KIV-2), es el responsable de que la Lipoproteina A sea mayor a 100mg/dl. También KIV-2 se asocia con polimorfismos genéticos relacionados a la enfermedad coronaria. También se analizo la presencia del alelo G en los polimorfismos de nucléotido simple (SNP) en las regiones rs10455872 y rs2048327, consideradas como factores de riesgo para el desarrollo de la cardiopatía isquémica.

Tipo de PCR: PCR en tiempo real

Pasos de la PCR:

Los polimorfismos de nucléotido simple (SNP) 10455872 y rs2048327 se analizaron usando alta resolución de fusión (HRM).
El análisis de la alta resolución de fusión (HRM) se realizó después de las amplificaciones.
El número de repeticiones fue medido por cuantificación relativa de la copia única del gen beta-actina, calibrado con el ADN de pacientes con niveles normales de Lipoproteina A, asociando un valor <1 con un número bajo de KIV-2 por repetición.

Visualización: Se llevo a cabo mediante electroforesis y tomografía axial computarizada (TAC), a través de estos dos métodos diagnósticos se pondero la calificación en los resultados del KIV-2 (por medio de la PCR utilizando la electroforesis) y de las calcificaciones cardio-vasculares (por medio de la TAC)